将人III型胶原a链与一种来源于病毒的4-羟脯氨酸酶在毕赤酵母中共表达，以获得能满足应用需求的羟基化胶原蛋白。分别构建包含酶与胶原基因的重组质粒pPICZB-L593和pPlC9K-COL3A1，并将质粒均转入毕赤酵母CSI15中以表达这两种蛋白。质粒测序结果表明目的基因成功插入到载体中；实时定量PCR结果显示两种基因均在mRNA水平表达;SDS-PAGE和Western Blot进一步证实两种蛋白在毕赤酵母GS115中的成功表达；氨基酸组成分析和质谱结果证实表达的胶原中含有羟脯氨酸。获得羟基化的胶原蛋白。